哈氏弧菌(Vibrio harveyi)lexA基因的克隆与原核表达

Genomics and Applied Biology(2018)

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摘要
LexA是调节SOS反应的阻遏蛋白,而且与细菌耐药性的形成密切相关.本研究以水产养殖经济动物的条件致病菌哈氏弧菌J0603基因组DNA为模板,设计同源引物克隆出SOS基因lexA,并对lexA基因进行了生物信息学分析;构建了lexA基因的原核表达载体PGEX-lexA,在大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达成功,还对LexA蛋白表达的诱导温度、时间、IPTG浓度等条件进行了优化.结果表明,lexA基因的开放阅读框为621bp,编码206个氨基酸,LexA蛋白理论分子量为22.68 kD;重组蛋白表达的最优条件为37℃、0.04 mmol/L IPTG诱导6h.
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