LTB抗原表位PT8A与重组轮状病毒VP8*亚单位疫苗融合后的免疫效应研究

为评价LTB(大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位)抗原表位PT8A与人轮状病毒(rotavirus,RV) VP8*基因融合后对VP8*亚单位疫苗(VP8)免疫效果的影响,将PT8A分别融合到VP8*基因的C-端和N-端,然后构建重组表达质粒pET32a-PT8A-VP8和pET32a-VP8-PT8A.表达的重组蛋白PT8A-VP8和VP8-T8A纯化后分别经鼻腔免疫BALB/c免疫小鼠,收集血清,间接ELISA法检测血清抗体水平.经测序鉴定,重组质粒pET32a-PT8A-VP8和pET32a-VP8-PT8A构建成功.6×His-VP8-PT8A、6×His-PT8A-VP8融合蛋白主要以包涵体形式表达,相对分子质量(Mr)约为34 kD.重组VP8-PT8A和PT8A-VP8表达成功,融合蛋白主要以包涵体形式表达.间接ELISA测量血清IgG和肺sIgA的滴度,与VP8组相比较,VP8 +LTB组和VP8-PT8A组OD值有显著性差异(p＜0.05),PT8A-VP8组OD值没有显著性差异(p＞0.05).即PT8A融合在VP8基因的C端后对重组轮状病毒VP8*亚单位疫苗有显著性免疫佐剂活性.