山茴香SRAP反应体系正交设计优化及引物筛选

为了加强对野生山茴香物种资源的保护,本研究在单因素试验基础上,对山茴香SRAP-PCR反应体系进行了正交设计优化,对主要影响因素:Taq酶、dNTPs、Mg2+、引物进行了4因素3水平的正交设计试验L9(34).研究表明,最佳反应体系为:Taq聚合酶0.06 U/μL,dNTPs 0.6 mmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,引物0.1 μmol/L,总体积25 μL.利用最优体系进行了引物筛选,从30对SRAP引物中获得了15对条带清晰,多态性良好的引物组合.本研究为利用SRAP技术进行山茴香种质资源分析、分子遗传育种等研究奠定了技术基础.