模式生物黑腹果蝇蛋白质组双向电泳条件优化

黑腹果蝇是生命科学领域研究常用的经典模式生物.本研究以黑腹果蝇为样品,在总蛋白提取、蛋白纯化和等电聚焦条件等三个方面对果蝇蛋白质组双向电泳条件进行优化,为果蝇比较蛋白质组学研究奠定基础.结果显示:(1)蛋白提取:利用Bullet Blender细胞组织破碎仪处理样品优于超声破碎及液氮研磨;(2)蛋白纯化:利用2D-clean up试剂盒纯化蛋白效果较好;(3)等电聚焦:等电聚焦总volt-hours在15 000 volt-hours左右时竖条纹相对较少;通过综合优化后的双向电泳技术所得到的蛋白图谱中蛋白点相对较多且圆滑,条纹现象较轻,重复性较好,满足后续软件分析以及数据处理的要求,适用于黑腹果蝇以及其他蝇类的蛋白质组学研究.