基于纳米金修饰的核酸适体生物传感器用于环孢素浓度的体外测定

利用环孢素(CsA)的两条高亲和力核酸适体生物传感器用于环孢素浓度的体外测定,在柠檬酸三钠为还原剂条件下,以氯金酸为原料,制备纳米金(Au)溶液,并对其进行表征,将aptamer-Ⅰ经酰胺化反应共价结合到磁性纳米颗粒表面,以纳米金(Au)修饰aptamer-Ⅱ,以固定在磁性纳米颗粒表面的aptamer-Ⅰ与环孢素孵育,再与Au-aptamer-Ⅱ作用,形成磁性纳米颗粒/环孢素/纳米金三明治夹心结构,磁分离技术分离三明治复合物,210nm处检测分离前后紫外吸收强度的变化,对环孢素进行定量检测.结果紫外检测结果显示,制备的纳米金溶胶在520nm处呈现典型的吸收峰,JEM-4 000EX电镜结果显示,纳米金溶胶颗粒粒径分布均匀、形貌、分散度较好,粒径大小在30nm左右,此法对环孢素的响应范围是50～1 500 ng/mL,其线性回归方程为Y=4×10-3X+5.769×10-1,R=0.997 3.此法可在1～2 h内完成检测,有望用于血液环孢素浓度的测定.