携带绿色荧光报告基因的EBV-LMP1真核表达载体构建与鼻咽癌细胞中的表达
Genomics and Applied Biology（2015）
摘要
潜伏膜蛋白1 (LMP1)是由EB病毒编码的致瘤蛋白,众多研究表明LMP1蛋白可通过NF-κB、p38 MAPK、c-JNK等多条重要信号通路引起鼻咽癌细胞的生物学行为改变.我们从EB病毒阳性的B95-8狨猴淋巴瘤细胞中克隆EB病毒LMP1cDNA,构建携带绿色荧光基因的真核表达质粒pIRES2-Zs-Green1-LMP1,通过脂质体转染的方法将质粒导入鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2中,利用质粒所携带的绿色荧光蛋白表达粗略计算转染的效率,通过免疫细胞化学(ICC)、RT-PCR、Western-Blot检测该质粒的表达.本实验室所构建的pIRES2-Zs-Green1-LMP1表达质粒能在鼻咽癌细胞内表达LMP1蛋白,为后续的实验研究奠定基础.
更多关键词
EBV latent membrane protein 1 (EBV-LMP1),cDNA clone,Eukaryotic expression vector,PlasmidpIRES2-Zs-Greenl
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