白头翁汤正丁醇提取物对白念珠菌 VVC 临床株体外生物膜形成的抑制作用

目的：探讨白头翁汤正丁醇提取物(Butyl alcohol extract of Bai Tou Weng decoction,BAEB)对分离自外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)的白念珠菌临床分离株(以下简称 VVC 临床株)生物膜形成的影响。方法采用微量稀释法测定 BAEB 对白念珠菌的最低抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)；甲基四氮盐(XTT)还原法测定 BAEB 对白念珠菌生物膜代谢活性的影响,Time-kill 法检测 BAEB 对白念珠菌活菌数的影响；结晶紫染色法测定BAEB 对白念珠菌生物膜生物量(Biomass)的影响；扫描电镜(SEM)观察 BAEB 对白念珠菌生物膜形态结构的影响；激光共聚焦显微镜(CLSM)检测 BAEB 对白念珠菌生物膜荧光信号强度的影响；实时荧光定量 PCR (qRT-PCR)检测生物膜相关基因UME6、PES1和 HSP90的转录水平变化。结果 BAEB 对12株白念珠菌的 MIC 在64~256μg/mL 之间,对白念珠菌生物膜的 SMIC80(抑制80%生物膜形成的最低药物浓度)为1024μg/mL 或以上；Time-Kill 曲线显示在12 h 之后,512、1024μg/mL 浓度的 BAEB 对白念珠菌均具良好的杀伤作用；结晶紫染色法表明512、1024μg/mLBAEB 能够减少其生物膜生物量；SEM 观察到1024μg/mL BAEB 能够有效抑制白念珠菌在不同黏附介质上生物膜的完整度；CLSM 显示512、1024μg/mL 的 BAEB 可以明显降低生物膜荧光信号强度；qRT-PCR 检测显示在256、512、1024μg/mL 的 BAEB 作用下,UME6转录水平分别下调了72%、71%、77%,在512、1024μg/mL 的 BAEB 下 HSP90转录水平上调了2.23和3.31倍,而 PES1未有明显变化。结论 BAEB 可以抑制白念珠菌 VVC 临床株体外生物膜的形成。