密码子优化的(GGGGS)3对重组人血清白蛋白在毕赤酵母中表达的影响

为探讨密码子优化的( GGGGS) 3对重组人血清白蛋白在毕赤酵母中表达的影响,分别用PCR的方法扩增出hsa和hsa-(ggggs)3,经BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切后与 BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切的 pPIC9K连接,构建成 pPIC9K-HSA与pPIC9K-HSA-(GGGGS)3重组分泌表达载体,转化大肠杆菌感受态细胞DH-5α后,表达载体分别用SalⅠ线性化后电击转化至毕赤酵母SMD1168感受态细胞中,将阳性转化子进行PCR鉴定并用甲醇诱导表达. SDS-PAGE分析表明HSA-( GGGGS) 3比HSA的表达量高约170. 57%,Western Blotting表明HSA与HSA-( GGGGS) 3均具有与人血清白蛋白相同的免疫原性. 密码子优化的( GGGGS) 3可以提高重组人血清白蛋白在毕赤酵母中的表达.