蓝点马鲛mstn克隆及表达分析

利用同源克隆和cDNA末端快速扩增( RACE)技术克隆了蓝点马鲛肌肉生长抑制素基因( mstn) ,并分析了mstn的结构特征和亲缘关系. 克隆的蓝点马鲛mstn共3870 bp,包括3个外显子1131 bp和2个内含子1201 bp. 外显子Ⅰ379 bp,内含子Ⅰ374 bp,外显子Ⅱ371 bp,内含子Ⅱ827 bp,外显子Ⅲ381 bp,5'UTR 108 bp,3'UTR 1430 bp. 3'UTR含有加尾信号AATAAA. mstn共编码376个氨基酸,包括信号肽(1 aa~22 aa)、TGF-β前肽区域(37 aa~257 aa)和TGF-β功能域(282 aa~376 aa). 在内含子Ⅱ和3'UTR发现微卫星序列,分别为(CA)5和(CA)10TG(CA)6CT(CA)10. 蓝点马鲛MSTN具有脊椎动物MSTN的共同特征,含一个蛋白酶水解位点RARR和9个保守的半胱氨酸残基. 脊椎动物MSTN氨基酸序列的亲缘关系分析发现,蓝点马鲛与鳜鱼亲缘关系最近,与其他鲈形总目鱼类聚为一簇. 以β-actin为内参基因,qPCR分析表明,蓝点马鲛mstn在二龄鱼不同组织表达情况不同,在鳃、肝和肾中表达较高,而在肌肉、肠、胃、脾和性腺中表达量较低. 这些结果可为蓝点马鲛肌肉生长和发育的分子机制研究提供信息.