无菌马尾松种子超低温保存技术研究

该研究利用液氮将不同含水量的无菌马尾松种子(27.4％、24.6％、22.7％、16.8％、15.8％、10.7％、7.5％、6.1％、4.8％、3.2％)进行超低温保存.结果表明:(1)在3.2％～6.1％含水量范围内,经液氮冷冻保存后的发芽率随着含水量升高而逐渐升高,在含水量6.1％时,发芽率达到最大值(91.33％);当含水量大于6.1％时,发芽率逐渐下降,尤其是当含水量大于15.8％时,发芽率迅速下降;在3.2％～7.5％含水量范围内冻存后发芽率在80％以上.(2)冷冻、化冻方式影响超低温保存效果.种子无需低温预冷,直接投入液氮保存(快速冷冻)效果最好;室温空气化冻(缓慢化冻)较42℃水浴化冻发芽率高,且后者容易发生种皮炸裂现象.(3)种皮对马尾松种子超低温保存过程起到保护作用,使其免受机械损伤,去掉外种皮的种子冻存后发芽率显著下降,且容易出现形态不正常的幼苗.(4)超低温保存对马尾松种子萌发具有一定"刺激"作用,在最适含水量6.1％时,经超低温保存后种子的发芽率显著大于对照种子.总之,含水量、冷冻方法、化冻方法、种皮结构显著影响超低温保存效果,马尾松种子超低温保存的最优方法是将种子含水量控制在6.1％,直接投入液氮快速冷冻后室温空气缓慢化冻,冻后发芽率可在90％以上.马尾松种子超低温保存技术体系的建立,为其种质资源的长期保存提供了技术支持.