空肠弯曲菌荧光偏振抗体检测方法的建立

为建立血清中空肠弯曲菌抗体的荧光偏振检测(FPIA)方法,本研究对空肠弯曲菌的黏附蛋白PEB1A进行原核表达.Western blot鉴定显示该重组蛋白具有良好的抗原性;FITC标记空肠弯曲菌黏附蛋白PEB1A形成示踪物,通过确定示踪物的最佳反应浓度、反应时间及血清最佳稀释度,建立空肠弯曲菌的FPIA抗体检测方法.结果显示:本实验建立的空肠弯曲菌FPIA抗体检测方法的检测标准为FP值≥150mP为阳性,FP值＜150为阴性.该方法仅与空肠弯曲菌阳性血清发生特异性反应,与产肠毒素型大肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、金黄色葡萄球菌的抗血清均无交叉反应,具有较强的特异性.该方法对抗体的最低检测效价为1:80,批内和批间的重复性试验变异系数均小于10％,具有较好的重复性.表明本研究建立的FPIA方法为血清中空肠弯曲菌抗体的快速检测提供了一种可行的方法.