禽流感病毒M2蛋白抑制细胞自噬体降解的研究
Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine（2017）
Abstract
为探究禽流感病毒(AIV)M2蛋白对细胞自噬的影响,本研究构建了pEGFP-LC3和pCAF-M2重组质粒,并采用脂质体将这两种重组表达质粒共转染293T细胞或Hela细胞中,同时以单独转染这两种重组质粒的细胞作为对照组,利用间接免疫荧光和western blot的方法检测细胞自噬体及自噬流情况.自噬体检测结果表明,AIV M2蛋白能够诱导转染细胞内自噬体积累.通过LC3-Ⅱturnover试验、mRFP-GFP-LC3双荧光指示系统以及pEGFP-LC3与LAMP1的共定位检测进一步证明,M2蛋白通过阻断自噬体与溶酶体融合,抑制溶酶体对自噬体的降解从而诱导自噬体积累.本研究揭示AIV M2蛋白对细胞自噬的发生具有重要作用,为深入研究自噬在A型流感病毒复制中的调节作用奠定基础.
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