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A群猪轮状病毒VP6结构蛋白在杆状病毒系统中的表达及鉴定

Lin YUAN,Yu ZHANG,Yang LIU,Jing-yi WANG,Zhan-ying KOU,Wen-hua KANG,Lin YANG,Chuan-bin WANG,Jian-qiang NI

Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine（2018）

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Abstract
为在杆状病毒表达系统中表达和纯化A群猪轮状病毒(PoRVA) VP6结构蛋白,在PoRVA VP6基因5'端融合添加组氨酸标签(6 ×His)后,克隆至杆状病毒表达载体pFastBac HTB中,得到重组转移载体pFastBac-VP6,并将其转化至DH 10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选.将鉴定正确的重组杆状病毒杆粒转染Sf9细胞后收获重组杆状病毒rBac-PoRVA-VP6,经SDS-PAGE和western blot鉴定结果显示,表达的PoRVA重组VP6蛋白约45 ku,并且能够被PoRVA阳性血清识别.上述结果表明,经杆状病毒表达系统表达的重组VP6蛋白具有良好的反应原性,为建立PoRVA抗体检测技术奠定了基础.
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