中间锦鸡儿CiNAC038启动子的克隆及对激素响应分析

NAC转录因子家族是植物中特有的、家族数目较多的一类转录因子家族,对植物生长发育起重要作用.了解CiNAC038的表达调控分子机制,为中间锦鸡儿CiNAC038功能研究奠定基础.以中间锦鸡儿为植物材料,通过染色体步移法克隆启动子序列,并对启动子序列上的响应元件进行分析.构建GUS表达载体,并转化拟南芥,对拟南芥的组织特异性进行表达分析,用ABA诱导转基因植株,研究ABA与CiNAC038的关系.结果显示,克隆了1800 bp的CiNAC038启动子序列,该启动子包含多种顺式元件.成功构建植物表达载体ProCiNAC038:GUS,通过浸花法转化至野生型拟南芥.GUS组织化学染色结果显示,转基因拟南芥幼苗根部染色较深,胚轴无染色;成熟期转基因拟南芥的叶脉、果荚两端、花瓣、花药等组织染色较深,茎无染色.CiNAC038启动子驱动的GUS报告基因主要在植物叶片、根和花的组织器官表达.进一步ABA诱导表达分析发现,GUS染色随着浓度增加颜色越浅.CiNAC038启动子是ABA抑制型启动子.