凡纳滨对虾黑鳃病病原的分离鉴定及耐药性分析

旨在鉴定凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)越冬亲虾出现黑鳃病的病原并对该病原进行耐药性分析.采用平板分离法从濒死的病虾病灶(鳃丝)分离到一株优势菌株,综合菌体的形态学鉴定以及真菌ITS-rDNA基因序列进行分析.结果显示,优势菌株与腐皮镰刀真菌(Fusarium solani)的序列同源性达99％以上,构建的系统发育树与腐皮镰刀真菌聚为一类,最终确定分离的优势菌株为腐皮镰刀真菌.进一步根据柯赫氏法则进行人工感染试验,证实其为病原菌且具有较强的致病性,病虾出现黑鳃,以5.0×105 CFU/mL浓度感染的对虾(25μL/尾)7 d致死率为53.33％.选取11种常见药物,采用琼脂稀释法和参照美国国家临床试验标准委员会(NCCLS)的M38-A2方案进行药物敏感试验,初步筛选后发现该菌株对克霉唑、益康唑、特比萘芬、制霉菌素、那他霉素、酮康唑等6种药物敏感,且益康唑的最小抑菌浓度(MIC)为1μg/mL,特比萘芬MIC为4μg/mL,对克霉唑、那他霉素的MIC为8μg/mL,对咪康唑、伊曲康唑的MIC为16μg/mL.本研究确定了分离到的优势菌株的致病性、耐药性和分类地位,为凡纳滨对虾越冬亲虾黑鳃病的防控提供了参考.