不同沉淀方法处理胶乳总 RNA 对基因扩增效率的影响

为探明沉淀方法对胶乳总 RNA 提取及 PCR 扩增效率的影响，并寻求较好的 RNA 沉淀方法，针对胶乳中蛋白、多糖、橡胶粒子含量高的特点，在本实验室改进的 SDS 法的基础上，分别用 LiCl、NaCl+异丙醇、NaCl+NaAc+无水乙醇和 NaAc+无水乙醇对橡胶树胶乳总 RNA 进行沉淀，并对所得 RNA 的完整性、纯度、含量和 RT-PCR 扩增效率进行比较。结果表明，4种方法均可获得完好的 RNA，但其纯度、含量和 PCR 扩增效率随方法不同而有所差别，其中 NaCl+NaAc+无水乙醇沉淀的橡胶树胶乳总 RNA纯度、产率和18S、REF 基因扩增效果均较高，故认为用 NaCl+NaAc+无水乙醇沉淀胶乳总 RNA 是一种较为有效的方法。