低表达UHRF1通过Wnt/β-catenin信号通路抑制非小细胞肺癌细胞增殖能力的研究

目的 探讨泛素样含PHD和环指域蛋白1(Ubiquitin like PHD and ring finger domain 1,UHRF1)与肺腺癌的作用及其潜在的作用机制.方法 通过生物信息方法检测UHRF1在肺腺癌中的表达.实时定量PCR及免疫蛋白印记检测UHRF1在肺腺癌细胞中的表达.MTT实验,Ki67染色和克隆形成方法检测正常组,阴性对照组低表达UHRF1组肺腺癌细胞系A549活性的变化.通过免疫蛋白印记的方法检测增殖相关蛋白PCNA,Rb,CDK4/6的变化,以及Wnt/β-catenin信号通路中经典蛋白β-catenin以及GSK-3β 的变化.结果 UHRF1在肺腺癌中相对于癌旁组织表达升高(P＜0.05).在肺腺癌细胞系(A549和H1299)相对于16HBE表达上调(P＜0.05).MTT法和克隆形成实验表明敲除UHRF1能够降低A549细胞生长效率(P＜0.05).Ki-67免疫荧光染色显示沉默UHRF1后A549细胞增殖能力下降(P＜0.05).此外,沉默UHRF1导致PCNA CDK4/6表达相对于对照组明显降低,而Rb蛋白相对于对照组表达升高(P＜0.05).沉默UHRF1抑制能够使 β-catenin的蛋白相对于对照组表达下调,GSK-3β 的蛋白相对于对照组表达上调(均P值＜0.05).结论 UHRF1基因在非小细胞肺癌尤其是肺腺癌中具有重要作用,UHRF1可能是一个潜在预防、治疗的肺腺癌的一个重要因子.