人γhG-CSF动员的外周血采集物来源的树突状细胞成熟诱导的研究

目的 探讨优化人γhG-CSF动员的外周血采集物来源的树突状细胞(DC)成熟诱导条件.方法 利用密度梯度离心法从重组人粒细胞集落刺激因子(γhG-CSF)动员的外周血采集物分离出单个核细胞,以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和重组人白细胞介素-4(IL-4)体外诱导成不成熟树突状细胞(imDC),分别采用传统细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2)和改良细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、polyI:C、CpG ODN)刺激成熟.3d后收获成熟DC,观察细胞形态、流式细胞仪检测DC的内吞能力通过异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-Dextran)、检测DC表面CD83、CD1a、CD80、HLA-DR、CD86和CCR-7,酶联免疫吸附法(ELISA)检测其IL-12的分泌,MTT法检测其刺激淋巴细胞增殖活性.结果 两种方法均能诱导DC成熟,以改良细胞因子鸡尾酒效果更佳,FITC-Dex-tran的内吞能力明显下降；CD83、CD1a的表达率分别是84.44％、87.94％ (P ＜0.05)；IL-12分泌量明显增高,成熟DC能有效的刺激T淋巴细胞增殖.结论 改良细胞因子鸡尾酒法可能是诱导DC成熟的最佳方法.