原花青素对小鼠后肢缺血肌肉的作用及miR-133b的表达变化

肢体缺血后的氧化应激反应将导致肌肉损伤,刺激肌卫星细胞(satellite cells,SCs)的成肌分化,从而完成损伤修复,而肌源性miRNAs参与其中.原花青素(proanthocyanidins,PC)来源于植物多酚提取物,具有抗氧化应激的作用.但原花青素对缺血肌肉的作用和机制尚不明确.本文研究原花青素对小鼠后肢缺血肌肉的作用,探讨miR-133b在其中的表达及作用.雄性C57/BL6小鼠经左后肢缺血后随机分为:对照组(H2O)、低浓度PC(low dose PC,LDPC)组(1 mg/kg)和高浓度PC(high dose PC,HDPC)组(20 mg/kg).对缺血肢体运动功能评分:7d时,对照组为1.33±0.14,LDPC组为1.50±0.15,HDPC组为2.08±0.23;14 d时,对照组为2.17±0.31,LDPC组为2.00±0.37,HDPC组为3.83±0.17.说明高浓度PC可促进缺血肢体运动功能恢复(P＜0.05).测定各组的氧化应激产物丙二醛含量,在7d时:血浆中,对照组为32.85±7.61 nmol/μL,LDPC组为35.90±7.45 nmol/μL,HDPC组为10.46±2.49 nmol/μL;缺血肌肉中,对照组为39.75 ±7.61nmol/μg,LDPC组为28.75±7.05 nmol/μg,HDPC组为15.80±3.63 nmol/μg.表明高浓度PC可有效降低后肢缺血小鼠体内氧化应激水平(P＜0.05).HE染色结果显示,高浓度组再生肌纤维比例(7d,53.88％±8.13％;21 d,39.30％±0.37％)均明显高于(P＜0.05)对照组(7d,10.61％±3.00％;21 d,22.61％±3.16％)和低浓度组(7d,14.57％±2.94％;21 d,18.74％±4.73％).RT-qPCR检测缺血肌肉中miR-133b-3p含量,与对照组相比,高浓度组的miR-133b-3p表达上调(3.26倍,P ＜0.05).生物信息学分析发现,PPP2 CA、PPP2CB和MKP-1可能是miR-133b-3p的靶基因.Western印迹检测发现,与对照组相比,高浓度组PCNA、MyoD和ERK2表达升高,而p-ERK2表达下降(P＜0.05).以上结果说明,高浓度原花青素可降低缺血后的氧化应激反应,促进缺血肌肉再生,而miR-133b-3p和ERK信号通路可能参与其中.