miR-9-5p靶向抑制Ambra1促进舌癌细胞增殖

miRNAs在肿瘤中异常表达,且与肿瘤的发生发展密切相关.目前发现,miR-9-5p在肿瘤中可能发挥原癌或抑癌效应,功能尚未完全阐述清楚.本文拟探讨miR-9-5p在舌癌中的作用.前期研究中收集10例舌癌组织及配对的癌旁组织,实时荧光定量PCR技术检测后发现,miR-9-5p在舌癌组织中的表达量显著高于癌旁组织,且其在舌癌细胞中的表达量也明显高于正常舌上皮细胞.此外,在舌癌细胞Tca8113中过表达miR-9-5p显著增加细胞的增殖能力.生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验证实,miR-9-5p可直接结合在自噬/苄氯素1调节因子l(activating molecule in beclin1-regulated autophagy,Ambra1)的3'-UTR区域,靶向抑制Ambra1表达.Western印迹结果证实过表达miR-9-5p降低Ambra1的表达,反之亦然.Ambra1在舌癌细胞中的表达量显著低于正常舌上皮细胞.BrdU实验证实在舌癌细胞SCC-25中过表达Ambra1可显著抑制其增殖能力;相反,使用siRNA技术沉默Ambra1能够显著促进Tea8113细胞的增殖.在干预miR-9-5p的细胞中同时干预Ambra1的表达,结果发现Ambra1可显著逆转miR-9-5p对舌癌细胞增殖的促进作用.总之,miR-9-5p在舌癌中可能发挥原癌基因样作用,通过直接靶向抑制Ambra1表达进而促进舌癌细胞发生增殖.