单增李斯特菌lmo2192基因克隆与表达
Biotechnology（2019）
Abstract
[目的]对单增李斯特菌新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2的lmo2192基因进行克隆及原核表达.[方法]利用PCR方法扩增lmo2192基因,连接pMD19-T载体进行克隆,筛选阳性菌进行测序比对.构建重组表达质粒pET32a-2192,将其转入大肠杆菌感受态细胞,经诱导表达,利用SDS-PAGE与Western Blotting鉴定重组蛋白.[结果]扩增lmo2192基因序列长度为969 bp,与预期一致.该基因在大肠杆菌中大量表达,经SDS-PAGE和Western Blotting鉴定分析该产物为56 kDa左右的融合重组蛋白,与预期大小一致.[结论]成功克隆1mo2192基因,并获得大量表达,为进一步研究该基因功能奠定理论基础.
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