人乳头瘤病毒52型病毒样颗粒制备及其生物活性

[目的]利用大肠杆菌系统表达人乳头瘤病毒52型(HPV52) L1蛋白, 并获得HPV52病毒样颗粒(VLPs) .[方法]优化并合成HPV52L1基因, 构建p ET-30a-52L1表达载体粒, 转化大肠杆菌E. coli BL21 StarTM(DE3) .经IPTG诱导表达, 阳离子交换层析纯化, SDS-PAGE和Western Blotting鉴定, BALB/c小鼠免疫2次, 初次后4w检测免疫血清中HPV52中和抗体滴度.[结果]获得纯度90％的HPV52L1蛋白, 将获得的HPV52L1蛋白进行解组装和重组装形成VLPs, 动态光散射观察到粒径约为70nm, 透射电镜观察到50～60nm的均一VLPs, 中和抗体滴度达25600.[结论]大肠杆菌系统表达人乳头瘤病毒52型(HPV52) L1蛋白, 并经过一步柱层析纯化获得纯度达90％的L1蛋白, 经解组装重组装获得粒径大小为50～60nm的VLPs, 具有良好免疫原性.