抗菌肽Cec4的结构改造及抗菌活性研究

[目的]对抗菌肽Cec4进行结构改造,并评估优化小肽的稳定性及溶血性.[方法]采用序列截短、氨基酸替换的方式来改造Cec4.采用微量稀释法,检测改造后的Cec4对各类鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(MIC).绘制时间-杀菌曲线,并评估不同因素对抗菌肽抑菌活性的影响,最后通过溶血实验检测其安全性.[结果]①截短后的Cec4失去抑菌效果.②Cec4氨基酸替换后的Cec4-1、Cec4-2未能提升抑菌能力.Cec4-4的MIC值为Cec4的50％.③在24h,时间-杀菌曲线显示,Cec4-4的抑菌活性较Cec4高30％.④血清会影响抗菌肽活性,并且高浓度胰蛋白酶(1.0 mg/mL)会抑制Cec4-4抗菌活性.⑤溶血实验表明Cec4-4在1 mg/mL浓度下无溶血反应.[结论]截短使Cec4失去抑菌活性,氨基酸替换后的Cec4-4对各测试菌的抑菌活性较母肽提升了1倍,且抗菌肽在1mg/mL浓度下对人体无溶血反应.