人PSCA和PAP融合基因真核表达质粒的构建与表达
Biotechnology（2015）
Abstract
[目的]构建人PSCA和PAP融合基因的真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定.[方法]设计并合成人PSCA和PAP融合基因,然后将其定向克隆到真核表达载体pIRES-neo中,双酶切鉴定后,将重组质粒pIRES-neo-PSCA-2A-PAP瞬时转染293T细胞,采用流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术验证其表达.[结果]构建了pIRES-neo-PSCA-2A-PAP真核表达质粒,流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术结果显示融合抗原可以在293T细胞表达,阳性率高达67.85％.[结论]成功构建了融合抗原PSCA与PAP的真核表达质粒pIRES-neo-PSCA-2A-PAP,为建立稳定转染人PSCA和PAP融合基因的细胞系奠定了基础.
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