乳酸克鲁维酵母表达型T载体的研发及应用
Biotechnology（2014）
摘要
[目的]构建以乳酸克鲁维酵母表达载体pKLAC2为基础的表达型T载体.[方法]利用定点突变技术突变载体pKLAC2上的Xcm Ⅰ位点,获得表达载体pKL-MUT;PCR扩增含黄色荧光蛋白基因的Xcm Ⅰ酶切盒,通过EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ位点连接至表达载体pKL-MUT,构建成重组载体pKL-YFP,限制性内切酶Xcm Ⅰ酶切后即产生T载体pKL-T.连接融合基因14-3-3-ZsG转化至乳酸克鲁维酵母GG799.[结果]利用该T载体可成功克隆外源基因14-3-3-ZsG并在乳酸克鲁维酵母中表达14-3-3-ZsG蛋白,荧光和Western blotting验证正确.[结论]乳酸克鲁维酵母表达型T载体已成功构建,具有快速克隆高效分泌表达外源基因的特点,对于促进乳酸克鲁维酵母表达系统表达相关蛋白的产业化具有实际意义.
更多AI 理解论文
溯源树
样例
生成溯源树，研究论文发展脉络
Chat Paper
正在生成论文摘要