离心法增加HaCaT细胞的基因转染效率
Chinese Journal of Cell Biology（2018）
Abstract
HaCaT细胞是自发性的人永生化表皮细胞株,常用于皮肤功能与疾病的相关研究,但常规脂质体法转染该细胞的效率极低.该研究主要探讨离心是否能够增加脂质体法转染HaCaT细胞的效率.以Lipofectamine(R) 2000为脂质体转染试剂,pEGFP-C1为质粒转染HaCaT细胞后分别使用常规法和离心法处理,利用荧光倒置显微镜和流式细胞仪测定转染效率;细胞增殖活力实验检测离心是否对细胞活力产生影响;荧光素酶报告基因、Westem blot实验检测离心法实际效应对目的基因表达的影响.结果表明,离心法处理组所测得的转染效率均高于常规法处理组,差异有统计学意义.荧光素酶报告基因实验、Western blot实验则进一步证实了转染后离心的性价效应能增加目的基因的表达,具有较高的实用性.综上所述,常规转染步骤后离心能够增加HaCaT细胞的基因转染效率.
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