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SIRT6基因沉默对人肝癌细胞凋亡的影响及其机制研究

Chinese Journal of Cell Biology(2016)

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Abstract
该文旨在探讨慢病毒介导的沉默信息调节因子6(silent information regulator 6,SIRT6)基因沉默对人肝癌细胞凋亡的影响及其机制.逆转录PCR(RT-PCR)和Westem blot分别检测人肝癌细胞系(SK-Hep-1、Huh-7、PLC/PRF/5、HepG2)和永生化肝细胞系(MIHA)中SIRT6基因的表达水平;利用慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默IRT6的表达,并通过RT-PCR和Western blot验证其沉默效率;流式细胞术检测SIRT6基因沉默对人肝癌细胞凋亡的影响,进一步应用RT-PCR和Westernblot检测SIRT基因沉默对凋亡抑制蛋白基因(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)家族mRNA和蛋白质水平的影响;最后,应用流式细胞术分析X连锁凋亡抑制蛋白基因(X-linked inhibitor of apoptosisprotein gene,XIAP)在SIRT6基因沉默诱导的肝癌细胞凋亡中的作用.结果显示,SIRT6基因在人肝癌细胞系中表达上调;慢病毒介导的shRNA能抑制人肝癌细胞中SIRT基因的表达;沉默SIRT6基因的表达能诱导人肝癌细胞凋亡,并降低XIAP的mRNA和蛋白质水平;过表达XIAP能逆转SIRT基因沉默所诱导的人肝癌细胞凋亡.该研究结果提示,SIRT基因沉默可能通过调节XIAP的表达从而诱导人肝癌细胞凋亡.
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Key words
hepatocellular carcinoma,SIRT6,XIAP,apoptosis
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