共载TFPI-2及顺铂磁性纳米复合物的制备及其对鼻咽癌的治疗

构建共载组织途径抑制因子-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)及顺铂(cisplatin,CDDP)的磁性纳米(magnetic nanoparticles,MNP)复合物(MNP-CDDP/TFPI-2),研究该复合物对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的综合抑制效应.将前期制备的载CDDP磁性纳米颗粒(MNP-CDDP)和聚乙二醇单甲醚-聚乙烯亚胺(MPEG-PEI)TFPI-2静电吸附,制备MNP-CDDP/TFPI-2,通过红外光谱、透射电镜、激光粒度仪观察复合物的结构、粒径大小及电位,邻苯二胺(o-phenylenediamine,OPDA)法检测复合物中CDDP含量.通过流式细胞仪检测基因转染效率,分析磁性纳米复合物转染TFPI-2的情况;RT-PCR及Westem blot法检测CNE-2细胞转染TFPI-2质粒后TFPI-2 mRNA和蛋白表达情况.采用CCK-8实验、流式细胞术及Matrigel侵袭实验检测MNP-CDDP/TFPI-2对CNE-2细胞增殖、凋亡及细胞侵袭能力的影响.研究结果显示,纳米复合物成功合成,平均水动力学粒径151.2 nm,Zeta电位+14.5 mV,复合物中CDDP含量平均为120 μg/mL,包封率33.3％.复合物所载TFPI-2质粒转染率22.7％±2.5％.CNE-2转染TFPI-2质粒后,胞内TFPI-2 mRNA和蛋白表达明显增加.MNP-CDDP/TFPI-2组细胞生长抑制率及凋亡率分别为34.8％和42.3％,明显高于MNP-CDDP组(27.1％、38.0％)和(MPEG-PEI)TFPI-2组(1 8.9％、16.2％)(P＜0.05). Matrigel侵袭实验结果显示,纳米复合药物组穿膜细胞数为28±3个,明显低于对照组(P＜0.05),提示MNP-CDDP/TFPI-2组细胞侵袭和迁移能力降低.结果表明,本研究已成功构建携带TFPI-2表达基因及CDDP的MNP-CDDP/TFPI-2;体外实验显示,MNP-CDDP/TFPI-2对NPC细胞具有良好的综合抑制效应.