人α1抗胰蛋白酶的分离纯化及其对C-BSA型大鼠肾炎模型的影响

目的 分离纯化α1抗胰蛋白酶(alpha 1-antitrypsin,AAT),并评价其对C-BSA型大鼠肾炎模型的影响.方法 以Cohn组分Ⅳ(Cohn frcationⅣ,FⅣ)为原料,采用Q Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和S-200凝胶过滤柱层析纯化AAT,底物显色法检测其生物学活性.建立阳离子化小牛血清蛋白型大鼠肾炎模型,分别注射5.75和11.5 mg/kg的AAT,同时设正常组(未建模),隔日经大鼠腹腔注射给药1次,连续注射4周,模型组和正常组注射等体积的PBS.检测各组大鼠的尿常规及24h尿液总蛋白量,并对肾脏组织进行病理学检查,同时检测肾脏中IgG沉积及AAT、Desmin、Nephrin、Podocin的表达情况.结果 纯化的AAT纯度为96％,浓度为11.85 mg/mL,活性回收率为47.67％,比活为5.37.与模型组比较,高剂量AAT组大鼠24 h尿蛋白量明显降低(P＜0.05),尿常规部分指标有所改善,肾小球体积增大程度有所减轻;高、低剂量AAT组大鼠肾小球IgG沉积均略减少(P＞0.05),肾小球与肾小管AAT阳性表达量明显增加(P＜0.001),肾小球Desmin蛋白有减轻趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05);高剂量AAT组大鼠肾小球Nephrin及Podocin蛋白均明显增多(P＜0.05),低剂量AAT组略有升高趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 本纯化工艺可获得纯度较高的AAT,其对大鼠肾炎具有一定提高疗效的作用.