生物反应器微载体系统培养Sabin株脊髓灰质炎病毒条件的优化

目的 优化生物反应器微载体系统培养Sabin株脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)的条件,以提高Sabin株PV产量.方法 应用搅拌式生物反应器培养PV,对其进行Vero细胞培养密度、病毒培养温度及病毒接种MOI条件的优化,收获病毒液后,检测病毒D抗原含量和感染性滴度,并进行全基因组深度测序.结果 9.0g/L微载体培养Vero细胞得到病毒D抗原含量显著高于低微载体浓度培养结果(P＜0.01);病毒D抗原含量在34 ℃培养时最高(P＜0.01);病毒D抗原含量在MOI 0.050接种时最高(P＜0.05),MOI 0.010和MOI 0.005时无明显差异.Sabin Ⅰ型480、525和Ⅲ型Pfizer株472、2 493位点突变率随着细胞培养密度(微载体浓度)的增加而增加;提高病毒培养温度以及改变病毒MOI,大多数毒力相关位点突变率无明显变化.结论 提高细胞培养密度、以MOI 0.050接种病毒以及34℃培养病毒均有利于提高病毒产量.