乙型肝炎疫苗中聚乙二醇6000残留量HPLC-蒸发光散射检测器检测方法的建立及其验证

目的 建立测定乙型肝炎疫苗中残留聚乙二醇(PEG)6000含量的HPLC-蒸发光散射检测器(evaporative lightscattering detector,ELSD)法,并进行验证.方法 对ELSD条件进行优化后,按照色谱条件[色谱柱:TSK-GEL G2000-SWXL(5μm,125 A,7.8 mm×300 mm);流动相:0.025 mol/L醋酸铵溶液;流速:0.8 ml/min]上HPLC测定PEG6000标准溶液和样品中PEG6000含量,并考察该方法的线性、检出限、定量限、精密度、稳定性、回收率和适用性.结果 优化后的ELSD条件为:雾化室温度40℃,漂移管温度70℃,气体流速1.20 L/min.PEG6000含量在21.6 ～ 216 μg/ml范围内,该方法线性关系良好,r=0.999 5,最低检出限为2.16μg/ml,最低定量限为7.13 μg/ml;PEG6000标准溶液连续检测6次,RSD为0.72％;样品溶液置不同时间检测结果的RSD＜ 2％;不同浓度PEG6000标准溶液检测结果的回收率在97.3％ ～ 107.7％之间;使用建立的方法所有样品均未检出PEG6000,样品中含有Tween-20不干扰PEG6000的测定,分离良好.结论 该方法操作简便,灵敏度高,结果准确,适用于乙型肝炎疫苗中残留PEG6000的检测.