8、10A、11A及15B型肺炎链球菌荚膜多糖血清IgG抗体定量ELISA检测方法的验证

目的 对8、10A、11A及15B型肺炎链球菌荚膜多糖血清IgG抗体定量ELISA检测方法进行验证.方法 以第二代国际参考血清007sp为标准,检测国际参考血清89SF的8、10A、11A及15B型IgG抗体值,绘制标准曲线,确定检测范围、线性(R2)及最低检测限;以第二代国际参考血清007sp为标准,测定肺炎国际质控血清盘(12/278)共12份血清的各型抗体水平3次,以第一代国际参考血清89SF为标准,测定第二代国际参考血清007sp的各型抗体水平10次,计算回收率;连续测定质控血清2009S 、QC5 、QC6及第二代国际参考血清007sp的各型IgG抗体各10次,计算变异系数(CV);利用质控血清920进行抑制试验,验证方法的特异性.结果 国际参考血清89SF的8、10A、11A及15B型IgG抗体的最低检测限分别为0.58、0.85、0.46及0.67 ng/ml,检测范围分别为0.15～35.60、0.13～32.50、0.05 ～ 12.70及0.17～ 42.40 ng/ml,线性R2均＞0.99;除10A型的准确度较低外(46.15％),8、11A及15B型均较高(分别为76.92％、84.62％及84.62％);连续10次测定质控血清2009S、QC5、QC6及国际参考血清007sp各型IgG抗体的CV值为6.44％ ～ 18.19％;多糖抗原与血清抗体的反应具有特异性.结论 该方法具有良好的准确性、精密性及特异性,可用于肺炎球菌疫苗临床血清的检测.