Vero细胞无血清培养基的筛选及其培养流感病毒H5N1条件的优化

目的 筛选适宜Vero细胞培养的无血清培养基,并优化其培养流感病毒H5N1的条件.方法 取VP-SFM培养的Vero细胞(SFM-Vero),以增殖速率为指标,筛选无血清培养基[VP-SFM、EX-CELLTMVERO、VirusProTM VERO、自制无血清培养基1(SFM-1)和2(SFM-2)];采用中心组合实验(Box-Behnken)优化SFM-Vero培养流感病毒H5N1的pH、TPCK-Trypsin浓度和病毒接种MOI.结果 Vero细胞在VP-SFM和自制SFM-1培养基中生长情况好于其他无血清培养基;H5N1病毒株能够感染无血清适应的Vero细胞;SFM-Vero培养流感病毒H5N1较优条件为:pH 7.64,TPCK-Trypsin浓度0.68 μg/ml,MOI 0.01.在该条件下培养的流感病毒HA滴度可达768 HAU/50 μl,为正常培养基培养的Vero细胞的2.33倍.结论 筛选出适宜Vero细胞生长的无血清培养基,优化了流感病毒H5N1Vero细胞适应株无血清培养的条件.