第6套丙型肝炎病毒抗体诊断试剂国家参考品的研制

目的 研制第6套丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)抗体诊断试剂国家参考品.方法 从我国10省市血站及生物制品企业的供血员中筛选候选参考品血浆样本304份,采用国内外27种检测试剂进行HCV Ag、HCV Ab及HCV RNA检测后,应用CHIRON公司的RIBA HCV 3.0 SIA及MP公司HCV BLOT 3.0试剂进行确证检测;利用Abbott RealTime HCV GenotypeⅡ试剂,对HCV RNA阳性样本进行HCV基因型别检测,并以核苷酸序列测定方法对分型样本进行确认.通过分析上述检测数据,从中拟选出协作标定样本,邀请国内外生产或市场使用占较大份额的11个实验室参加该套参考品标定.取最低检出限参考品4份,分别于4、25和-20℃放置1、3、5、7、9和11d,或置-70℃反复冻融1～6次,进行稳定性试验.结果 选出65份样品组成第6套HCV抗体诊断试剂国家参考品,其中包括阴性参考品30份,阳性参考品30份,最低检出限参考品4份,精密性参考品1份.应用11家的16种HCV抗体试剂分别平行3次标定检测,阴、阳性参考品符合率均≥29/30;最低检出限参考品检测L1 ～ L3均为阳性,L4为阴性;精密性参考品检测CV在1％ ～11％之间.不同温度保存11d及-70℃保存反复冻融6次的检测结果均符合要求(P＞0.05).结论 建立了应用于血液筛查丙型肝炎病毒抗体试剂质量控制的第6套HCV抗体国家参考品.