乙型脑炎减毒活疫苗(SA14-14-2株)的纯化

目的 建立纯化乙型脑炎减毒活疫苗(SA14-14-2株)的方法.方法 应用超滤浓缩和分子筛凝胶柱层析纯化乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14-2病毒液,检测其病毒滴度、原代地鼠肾细胞残留蛋白含量、牛血清白蛋白残留量、庆大霉素残留量,并进行小鼠脑内致病力试验、乳鼠传代返祖试验、异常毒性试验,制备纯化冻干疫苗,进行热稳定性试验.结果 纯化后的JEV病毒滴度高于7.0 lgPFU/ml,平均回收率为23％;牛血清白蛋白残留量、庆大霉素残留量及安全性试验均符合《中国药典》三部(2010版)相关规定,去除了约95％的原代地鼠肾细胞残留蛋白;制备的冻干疫苗及热稳定性试验中的病毒滴度均高于5.7 lgPFU/ml,且热稳定性试验中病毒滴度下降未超过1.0lg,符合《中国药典》三部(2010版)规定.结论 建立了乙型脑炎减毒活疫苗(SA14-14-2株)纯化工艺,但病毒回收率较低,不适宜规模化生产,对乙型脑炎病毒减毒活疫苗质量控制具有指导意义.