鼠疫菌F1抗体双抗原夹心ELISA诊断试剂盒的研制

目的 研制鼠疫菌F1抗体双抗原夹心ELISA诊断试剂盒,并进行验证.方法 用纯化的鼠疫菌F1抗原作为包被抗原,HRP标记的F1抗原作为酶标抗原,建立鼠疫菌F1抗体双抗原夹心ELISA检测方法,连续制备3批诊断试剂盒,并建立内部质控品.对试剂盒进行板内板间精密性、敏感性、特异性、准确性和稳定性验证.结果 鼠疫菌F1抗原的最佳包被浓度为0.6 μg/ml,HRP标记的F1抗原的最佳工作浓度为1∶7000.制备的试剂盒检测精密性质控品的板内变异系数为6.5％,板间变异系数为7.1％;检测高、中、低浓度内部质控品和精密性质控品的回收率在95％ ～ 112％之间;检测阳性血清和阴性血清的敏感性为100％;与正常人血清、正常兔血清、正常小鼠血清、兔抗假结核耶尔森菌血清、小鼠抗假结核耶尔森菌血清均无交叉反应;试剂盒稳定性良好,有效期至少为1年.结论 成功制备了鼠疫菌F1抗体双抗原夹心ELISA诊断试剂盒,达到了体外诊断试剂的注册要求,可用于鼠疫的临床监测、诊断及预后判断.