CHOP双重调控衣霉素诱导的DU-145细胞凋亡及自噬的研究

目的 研究内质网应激分子CHOP调控细胞凋亡与自噬的作用和机制.方法 利用衣霉素诱导DU-145细胞产生内质网应激,Western Blot法检测内质网应激相关分子Grp78、Grp94、p-eIF2α和CHOP及自噬蛋白LC3Ⅱ、Atg5和Beclin1的表达;用流式细胞术检测细胞凋亡水平;沉默CHOP基因,用Western Blot法检测凋亡蛋白PARP、Caspase3的表达,流式细胞术检测细胞凋亡;并利用免疫荧光检测自噬标志性蛋白LC3B的表达.结果 衣霉素诱导DU-145细胞内质网应激能诱导一定程度的细胞凋亡,衣霉素处理8、12、24 h的细胞凋亡率分别为3.27﹪±1.02﹪,8.97﹪±0.71﹪和11.67﹪±1.41﹪,处理12 h及24 h的细胞凋亡率与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01).同时也能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路激活DU-145细胞自噬.CHOP基因沉默抑制细胞凋亡,shCtrl组细胞凋亡率为32.17﹪±3.93﹪,shCHOP-1组细胞凋亡率为23.53﹪±3.41﹪,两组相比差异具有统计学意义(P<0.05).且CHOP基因沉默能促进细胞自噬分子LC3B的表达.结论 衣霉素诱导DU-145细胞内质网应激状态下,CHOP在细胞凋亡与自噬之间发挥双重调控作用.