利用析因设计法优化神经干细胞分化为多巴胺能神经元的诱导方案

目的 优化实验设计将入神经干细胞(hNSCs)高比例诱导分化为多巴胺能神经元.方法 从aFGF、dbcAMP、普拉克索(PRX)、TPA和forskolin共计5种诱导因子中,使用单因素方法筛选出对hNSCs诱导为多巴胺能神经元有显著作用的诱导因子,显著性检验使用student's t检验.之后使用析因设计方法对选出的显著因子的诱导作用进行定量评估,找出每个因子对hNSCs诱导为多巴胺能神经元的诱导规律,统计学显著性使用方差分析.最后使用最快上升法找到每个显著因子的最佳浓度.结果 根据初步的单因素筛选实验,aFGF、dbcAMP、TPA被认为是对hNSCs诱导为多巴胺能神经元起诱导作用的因子.使用析因设计对aFGF、dbcAMP和TPA的因子效应进行建模,得出在初始的浓度下,aFGF和dbcAMP为阳性诱导因子,TPA为阴性诱导因子,并得出三者的浓度变化比例为0.29∶0.90∶-0.39.选取三者的步长分别为11 ng/ml、35 μmol/L和-15 nmol/L,使用最快上升法优化出三者最佳的浓度分别为166 ng/ml、310 μmol/L和10 nmol/L.最终多巴胺能神经元诱导比例可以达到(6.56±0.07)％,相比较对照提高了23.8％.结论 析因设计法可以有效的优化hNSCs诱导分化为多巴胺能神经元.