抗人IgG和抗人IgM单克隆抗体的特性鉴定及应用

目的:制备特异性高的抗人IgG和抗人IgM单克隆抗体,并应用于临床血清学检测试剂盒,为其提供优质的二抗.方法:以人IgG和IgM为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗人IgG和抗人IgM单克隆抗体;经体内诱生法制备腹水并纯化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western印迹进行交叉筛选和特异性鉴定,并对筛选出的单抗进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,再与市售的检测病原微生物抗体试剂盒中对应的HRP标记的二抗(抗人IgG和抗人IgM)做对比分析.结果:筛选到2株可稳定分泌抗人IgG单抗和2株抗人IgM单抗,经交叉反应、Western印迹及对比实验分析,证明这4株单抗效价高、特异性好,比临床试剂盒中的酶标二抗特异性强、敏感度高.结论:获得4株特异性强、敏感度高的抗人IgG和抗人IgM单克隆抗体,可为各种病原微生物血清学的检测提供二抗试剂,具有良好的应用价值.