人突触小体相关蛋白25单克隆抗体的制备及初步鉴定

Zhi-Jie SUN,Yong-Liang XU,Ling-Zhi LIU,Chu-Xi FU,Xiang-Hua XIONG,Xiu-Li BI,Wei-Cai ZHANG

Letters in Biotechnology（2019）

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Abstract

目的:制备抗人突触小体相关蛋白25(SNAP25)的鼠源单克隆抗体.方法:利用大肠杆菌表达SNAP25蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠制备杂交瘤细胞,筛选针对SNAP25的阳性杂交瘤细胞株,鉴定抗体亚型;用杂交瘤细胞株制备腹水单抗,纯化后利用SDS-PAGE检测抗体纯度.结果:表达并纯化得到纯度大于90％的SNAP25蛋白,免疫小鼠后经2轮筛选得到12株阳性杂交瘤细胞株,其中抗体重链包括IgG1、IgG2型,轻链大部分为κ链;选择具有相对较高抗原结合活性的14号杂交瘤细胞株制备腹水,纯化后得到纯度大于90％的抗体.结论:获得1株高纯度的针对SNAP25的鼠源单克隆抗体,为肉毒毒素的检测奠定了基础.

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