沙门菌常见O抗原和H抗原荧光PCR检测方法评估

目的:评估沙门菌常见A～F血清群O抗原和H抗原荧光PCR检测方法对不同血清型沙门菌的检测效果.方法:选用不同血清型沙门菌制备模板,运用沙门菌O抗原A～F群及不同H抗原荧光PCR检测试剂盒对这些菌株进行扩增检测,分别计算不同血清型检测结果的灵敏度、特异度、检测下限、假阳性率、假阴性率、Kappa值等指标并进行分析.结果:对7种不同沙门菌O抗原的检测灵敏度为85.71％～100.00％,特异度为66.67％～100.00％;对7种不同沙门菌H抗原的检测,H1,5及Hi-l的灵敏度不高,分别为35.71％及57.14％,但特异度均较高(87.50％～ 100.00％);经Fisher精确检验,除H1,5阳性检测的P＞0.05(P=0.162),其余为P＜0.05;C1、C2、D1、E、F血清群及H抗原1,6、1,7、g,s,t、g,m的检测结果与血清凝集结果的一致性较高(Kappa值均大于0.75),而H1,5及Hi-l的检测结果与血清凝集结果的一致性很差(Kappa值分别为0.302及0.492);试剂盒对不同O/H抗原核酸检测扩增效率较好,最低检出限为7～137608拷贝/反应.结论:除H1,5抗原外,该荧光PCR检测试剂盒对沙门菌O/H抗原不同血清型的检测效果较好,优于传统血清凝集方法,可显著提高血清型鉴定时效,有利于疾病或暴发的早期发现.