明胶酶谱实验方法的优化

目的：优化明胶酶谱实验方法，并检测不同浓度凝血酶刺激人皮肤成纤维细胞分泌的明胶酶B（MMP-9）活性的变化。方法：用含明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分开上清中各蛋白条带，经2.5% Triton X-100洗脱、明胶酶缓冲液孵育、考马斯亮蓝染色液染色及脱色液脱色后，经光密度扫描记录，应用ImageJ软件进行密度计量分析。结果：凝血酶刺激人皮肤成纤维细胞分泌MMP-9具有浓度依赖性。结论：利用优化的明胶酶谱实验方法可做出高质量的明胶酶谱图片，对检测明胶酶活性有重要意义。