炭疽芽胞杆菌A16R株FtsE蛋白的可溶性表达和纯化

目的：构建炭疽芽胞杆菌FtsE蛋白的原核表达载体，实现其在原核表达系统中的可溶性表达，并纯化融合蛋白。方法：用PCR方法从炭疽芽胞杆菌A16R株扩增得到ftsE基因片段，酶切后连接到pET28a原核表达载体，构建重组表达质粒pET28a-ftsE，转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株，筛选可溶性诱导表达与纯化融合蛋白的条件，以获得高纯度融合蛋白。结果：构建了FtsE蛋白的融合表达载体，并在大肠杆菌中获得高效表达；在20℃下，经0.1 mmol/L IPTG诱导3 h表达的产物主要是可溶性蛋白，经Ni-NTA亲和层析纯化获得了高纯度的FtsE融合蛋白，经Western印迹检测，目的蛋白表达正确。结论：实现了炭疽芽胞杆菌FtsE蛋白原核表达系统的可溶性表达并获得了高纯度融合蛋白，为后续研究奠定了基础。