嗜肺军团菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立

目的：建立针对嗜肺军团菌Mip基因的实时荧光定量TaqMan PCR检测方法，并进行自来水和空调冷却水模拟标本的检测评价。方法：根据嗜肺军团菌Mip基因的特异性序列设计引物和TaqMan探针，建立嗜肺军团菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法，对方法进行灵敏度及特异性评价，并对自来水和空调冷却水模拟标本中的嗜肺军团菌进行检测。结果：建立的方法对嗜肺军团菌的检测具有高度特异性，与3种非嗜肺军团菌和6种其他呼吸道病原均没有交叉反应；基因组DNA的检测灵敏度为1.6 pg/μL，模拟自来水和空调冷却水标本的检测灵敏度为10 CFU/mL。结论：建立的TaqMan荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速，适于嗜肺军团菌的日常监测和暴发疫情的应急诊断。