聚乙二醇修饰胰高血糖素样肽1类似物反应条件的响应面法优化
International Journal of Biologicals(2020)
摘要
目的:用响应面法对马来酰亚胺活化相对分子质量40 000的聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)(MAL-PEG
40K)修饰胰高血糖素样肽1类似物(glucagon-like peptide 1 analog,GLP-1a)的反应条件进行优化。
方法:对GLP-1a浓度、GLP-1a/MAL-PEG
40K摩尔比、反应液pH值、反应温度、反应时长进行单因素试验。以前3个条件为自变量,PEG修饰率为响应值,根据中心组合试验设计原理,研究各自变量及其交互作用对PEG修饰率的影响。通过高效液相色谱法分析PEG修饰率,依据回归分析确定各反应条件的最优值。
结果:GLP-1a与MAL-PEG
40K的最佳反应条件为:GLP-1a浓度2.5 mg/ml,GLP-1a/MAL-PEG
40K摩尔比1∶1.25,反应液pH8,反应温度4 ℃,反应时长60 min。该优化条件下,GLP-1a的PEG修饰率可达91.0%。
结论:响应面法获得了GLP-1a与MAL-PEG
40K的最佳反应条件。
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关键词
Glucagon-like peptide 1,Polyethylene glycols,Reaction conditions,Response surface methodology
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