静注人免疫球蛋白层析纯化条件的优化

目的 利用响应面法对阴离子交换介质在静注人免疫球蛋白层析纯化中的应用条件进行优化,确立最佳层析参数.方法 采用双因素三水平响应面法设计层析参数pH值和电导率,用双缩脲法和高效液相色谱法分别测定蛋白浓度和分子大小分布,以蛋白回收率、单体+二聚体含量评价纯化效果,获得最优层析参数并进行验证.结果 优化的层析纯化平衡和上样条件为pH5.4,电导率1.05 mS/cm.在该条件下以血浆组分Ⅱ为原料,层析后蛋白回收率为(96.6±3.1)％,IgG单体和二聚体比例为(99.98±0.02)％,IgA含量为(2.6±1.1)mg/L,IgM含量为(4.5±1.4)mg/L.结论 经响应面法优化后的阴离子交换层析,可用于纯化血浆组分Ⅱ制备静注人免疫球蛋白制品.