高效阴离子交换色谱-脉冲安培法对A群脑膜炎球菌结合疫苗中游离多糖的检测

目的 采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培法(high-performance anion-exchange chromatography with pulsed amperometric detection,HPAEC-PAD)检测A群脑膜炎球菌多糖-破伤风类毒素结合疫苗(group A meningococcal polysaccharide-tetanus toxoid conjugate vaccine,MenA-PS-TT)中的游离多糖含量.方法 采用1％脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,DOC)处理MenA-PS-TT分离游离PS.游离和结合PS经三氟乙酸水解后,用HPAEC-PAD检测水解产物,并将检测结果与改良钼酸铵分光光度法的检测结果进行比较.结果 1％DOC处理的样品的PS回收率为90％～104％,TT沉淀率为99％以上,说明1％DOC处理不会对游离和结合PS产生影响.HPAEC-PAD检测MenA-PS的重复性良好,3次MenA-PS标准品定位结果和3次MenA-PS-TT成品检测结果的相对标准偏差分别为1.7％和6.4％.HPAEC-PAD与改良钼酸铵分光光度法的检测结果相当.结论 HPAEC-PAD可用于MenA-PS-TT中的游离PS含量检测.