TLR2和TLR6在鸟分枝杆菌诱导巨噬细胞凋亡中的作用

[目的]建立鸟分枝杆菌感染巨噬细胞模型,探讨 Toll 样受体 2(TLR2)和 Toll 样受体 6(TLR6)在鸟分枝杆菌诱导巨噬细胞凋亡中的作用,为阐明鸟分枝杆菌致病机制提供依据.[方法]用鸟分枝杆菌感染 U9 3 7 细胞,于感染0 h、8 h、16 h、24 h和48 h后分别提取细胞总蛋白,并通过 Western blot方法检测TLR2 和TLR6 的表达;分别提取细胞培养上清液,利用 ELISA技术检测肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的变化情况.用鸟分枝杆菌感染阻断TLR2 和TLR6 后的 U937 细胞,通过 Western blot 方法分别检测其促凋亡因子 BAX 和抗凋亡因子BCL-2 的表达量,用 ELISA技术检测细胞培养上清液中TNF-α含量变化情况,用流式细胞仪检测 U9 3 7 细胞的凋亡变化.[结果]鸟分枝杆菌感染U9 3 7 细胞可引起 TLR2 、TLR6 和TNF-α表达上调;用鸟分枝杆菌感染阻断TLR2 和TLR6 后的 U937 细胞,可使 U937 细胞内促凋亡因子BAX和TNF-α表达量下降(P＜0.05),抗凋亡因子BCL-2 表达量升高(P＜0.05),并可以明显降低感染鸟分枝杆菌后的细胞的凋亡率(P＜0.05).[结论]TLR2 和TLR6 与巨噬细胞凋亡相关,巨噬细胞通过 TLR2 和 TLR6 来识别鸟分枝杆菌,而鸟分枝杆菌反过来通过促进TLR2 和TLR6 的表达来影响巨噬细胞相关凋亡通路,从而诱导巨噬细胞凋亡.