水稻齿叶矮缩病毒 P8蛋白的抗体制备及其在水稻原生质体内的表达动态

水稻齿叶矮缩病毒（rice ragged stunt virus ，RRSV）属于呼肠孤病毒科（Reoviridae）水稻病毒属（Oryzavirus）成员。该病毒引起的水稻齿叶矮缩病在我国南方发病严重，成为我国水稻生产上的重要病害。通过建立水稻原生质体培养体系，对RRSV主要外壳蛋白P8在水稻原生质体内的复制与表达情况进行研究。通过原核表达对 P8蛋白进行抗体制备，抗血清经Western印迹检测具有特异性，间接ELISA测得其效价为2500倍左右。以制备的抗血清为探针，通过Western印迹检测到P8蛋白在病毒侵染原生质体后24 h开始表达，48 h左右达到最大值，60 h后开始下降，但仍保持在较高水平；同时，利用荧光定量PCR技术，对病毒侵染水稻原生质体后的P8 RNA含量进行检测，结果表明，P8 RNA在8 h时开始积累，32 h左右达到最大值，48 h后表达量开始下降到一个平台期。