褪黑素通过调节TGF-β1/Smad通路抗腹膜透析相关性腹膜纤维化

目的 探讨褪黑素(N-乙酰-5-甲氧色氨酸,MT)通过调节TGF-β1/Smad通路抗腹膜透析相关性腹膜纤维化的机制.方法 将选取的60只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、低剂量药物组、中剂量药物组、高剂量药物组,每组12只.除正常对照组外,其余各组大鼠均采用腹腔注射4.25％的葡萄糖腹膜透析液制作腹膜纤维化模型.造模后,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予MT 0.125、0.5、2.0 mg·kg-1·d-1灌胃;正常对照组及模型对照组仅给予等体积生理盐水灌胃.适宜条件下培育4周后,处死大鼠并取适量腹膜、肠道组织及血液标本.腹膜、肠道组织行HE及Masson三色染色,观察腹膜和肠道黏膜病理组织学及壁层腹膜厚度变化.免疫组织化学法检测腹膜组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(o-SMA)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及肠黏膜Occludin蛋白相对表达量;凝胶电泳迁移分析法(EMSA)方法测定核因子(NF)-κB活性;双抗体夹心ELISA法检测样本中白介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子o(TNF-α)浓度.结果 模型对照组的大鼠壁层腹膜厚度、IL-1、TNF-α水平显著高于正常对照组和低、中、高剂量组(P ＜0.05,P＜0.01);高剂量组的大鼠壁层腹膜厚度、IL-1、TNF-α水平显著低于模型对照组和低、中剂量组(P＜0.05,P＜0.01).模型对照组的TGF-β1、MCP-1、α-SMA、Occludin蛋白表达水平及核因子(NF)-κB活性显著高于正常对照组和低、中、高剂量组(P＜0.05,P＜0.01),高剂量组的TGF-β1、MCP-1、α-SMA、Occludin表达水平及NF-κB活性显著低于模型对照组和低、中剂量组(P＜0.05,P＜0.01),高剂量组的TNF-α、α-SMA表达水平与正常对照组无统计学差异(P均＞0.05).结论 高糖腹腔注射可制作腹膜纤维化模型.MT可以适度调节TGF-β1/Smad通路、抑制NF-κB信号的传导,抑制引起腹膜纤维化的重要细胞内信号调节因子TGF-β1、NF-κB,缓解腹膜纤维化.